كيف يتم قياس كمية البروتين الكلي في العينات (طريقة BCA).
مبدأ هذه الطريقة يعتمد على قدرة البروتينات على اختزال النحاس ثنائي التأين (Cu+2) إلى النحاس أحادي التأين (Cu+1) وذلك في الوسط القاعدي وهو ما يعرف بالتفاعل ثنائي اليوريت (the biuret reaction)، وهذ المنتج يتحول إلى لون وردي عند إضافة حمض البيسنكرونيك (bicinchoninic acid). وتعود قدرة البروتين على اختزال النحاس الثنائي إلى نحاس أحادي إلى وجود الأحماض الأمينية (السيستين، السيستائين، الثيروزين والتريبتوفان).
وحيث أن شدة اللون ترتبط بشكل مباشر مع كمية البروتين، فكلما كان اللون أشد دل ذلك على كمية بروتين أكثر ومن هنا يعمد إلى قياس شدة اللون من خلال جهاز المطياف عند طول موجي 562 نانومتر.
وحتى يتم حساب كمية البروتين على شكل نانوغرام لابد من عمل المنحنى القياسي بواسطة طريقة BSA.
الكلمات المفاتحية: BSA , bicinchoninic acid , البروتين , كمية
معلومات البحث
فيديو البحث
شارك البحث